Monkeypox Virus Real Time PCR Kit

Deskrizzjoni qasira:

Cat.Nru	B001P-01	Daqs	48 Testijiet/Kit
Kampjun	Serum/Leżjoni Exudate	Trans.& Sto.Temp.	-25～-15℃
Format	It-taħlit minn qabel ġie lajofilizzat u alikkwotat fi 8 tubi tal-PCR tal-istrixxa
Strument Applikabbli	Strument PCR f'ħin reali bħal ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio u BTK-8

Ibgħat email lilna

Dettall tal-Prodott

Tags tal-Prodott

Dettalji tal-prodott

Użu Intenzjonat

Jintuża għall-iskoperta tal-Virus Monkeypox fis-serum uman jew kampjuni ta' exudate tal-leżjoni bl-użu ta' sistemi PCR f'ħin reali.

Prinċipju tat-Test

Dan il-prodott huwa sistema ta 'assaġġ ta' PCR f'ħin reali Taqman® ibbażata fuq sonda fluworexxenti.Primers u sondi speċifiċi huma ddisinjati għall-iskoperta tal-ġene F3L tal-Virus Monkeypox.Kontroll intern li jimmira l-ġene konservat tal-bniedem jimmonitorja l-ġbir tal-kampjun, l-immaniġġjar tal-kampjuni u l-proċess ta 'PCR f'ħin reali biex jiġu evitati riżultati negattivi foloz.Il-kit huwa sistema liofilizzata kompletament taħlita minn qabel, li tinkludi materjali meħtieġa għall-iskoperta tal-Virus Monkeypox: enzima ta 'amplifikazzjoni ta' aċidu nuklejku, enzima UDG, buffer ta 'reazzjoni, primer speċifiku u sonda.

Kontenut Prinċipali

Il-komponenti pprovduti huma elenkati fit-tabella.

Komponenti	Pakkett	Ingredjent
Virus tal-ġidri tax-xadiniTaħlita minn qabel lajofilizzata	8 strixxa PCR tubi× 6 boroż	Primers, sondi, Ħallat dNTP/dUTP, Mg2+, Taq DNA polymerase, Enżima UDG
Kontroll Pożittiv MPV	400 μL × 1 tubu	Sekwenzi tad-DNA li fihom il-ġene Target
Kontroll Negattiv tal-MPV	400 μL × 1 tubu	Sekwenzi tad-DNA li fihom segment tal-ġene uman
Soluzzjoni li tħoll	1 mL × 1 tubu	Stabbilizzatur
Ċertifikat ta' Konformità	biċċa 1	/

Fluss tal-Operazzjoni

1. KampjunĠbir:Il-kampjun għandu jinġabar f'tubi sterili skond

bi speċifikazzjonijiet tekniċi standard.

2. Preparazzjoni tar-Reaġent (Żona ta' Preparazzjoni tar-Reaġent)

Oħroġ il-komponenti tal-kit, ibbilanċjahom f'temperatura tal-kamra għall-użu standby.

3. Ipproċessar tal-Kampjuni (Żona tal-Ipproċessar tal-Kampjuni)

3.1 Estrazzjoni ta 'aċidu nuklejku

Huwa rakkomandat li jittieħdu kampjuni likwidi ta '200μL, Kontroll Pożittiv u Kontroll Negattiv għall-estrazzjoni tal-aċidu nuklejku, skont ir-rekwiżiti u l-proċeduri korrispondenti ta' kits tal-estrazzjoni tad-DNA virali.

3.2 Ħoll ta 'trab lijofilizzat u żieda ta' mudell

Ipprepara Monkeypox Virus Lyophilized taħlita minn qabel skont in-numru ta' kampjuni.Kampjun wieħed jeħtieġ tubu PCR wieħed li jkun fih trab lijofilizzat minn qabel.Kontroll negattiv u kontroll pożittiv għandhom jiġu ttrattati bħala żewġ kampjuni.

(1) Żid 15μL Soluzzjoni ta' Ħoll f'kull tubu PCR li jkun fih taħlita minn qabel Lyophilized, imbagħad żid 5μL kampjuni estratti/Kontroll Negattiv/Kontroll Pożittiv f'kull tubu PCR rispettivament.

(2) Għatti t-tubi tal-PCR sewwa, daqqa t-tubi tal-PCR bl-idejn sakemm it-trab lajofilizzat jinħall u jitħallat kompletament, iġbor il-likwidu fil-qiegħ tat-tubi tal-PCR permezz ta 'ċentrifugazzjoni istantanja b'veloċità baxxa.

(3) Jekk tuża strument komuni tal-PCR f'ħin reali għall-iskoperta, imbagħad ittrasferixxi direttament tubi tal-PCR fiż-żona tal-amplifikazzjoni;jekk tuża BTK-8 għall-iskoperta, imbagħad jeħtieġ li twettaq l-operazzjonijiet li ġejjin: ittrasferixxi 10 μL likwidu minn tubu PCR għall-ċippa tar-reazzjoni sew ta 'BTK-8.Tubu PCR wieħed jikkorrispondi għal bir wieħed fuq iċ-ċippa.Waqt it-tħaddim tal-pipetta, kun żgur li l-pipetta tkun 90 grad vertikali.Il-ponot tal-pipetta tal-barriera tal-ajrusol għandhom jitqiegħdu fiċ-ċentru tal-bir b'forza moderata u jieqfu jimbuttaw il-pipetta meta tilħaq l-ewwel ger (biex jiġu evitati bżieżaq).Wara li l-bjar jimtlew, oħroġ membrana taċ-ċippa ta 'reazzjoni biex tkopri l-bjar kollha u ċ-ċippa mbagħad tiġi trasferita fiż-żona ta' skoperta ta 'amplifikazzjoni.

4. Amplifikazzjoni tal-PCR (Żona ta' Kxif)

4.1 Poġġi t-tubi PCR/ċippa tar-reazzjoni fit-tank tar-reazzjoni u poġġi l-ismijiet ta 'kull reazzjoni sew fl-ordni korrispondenti.

4.2 Issettjar ta' fluworexxenza ta' skoperta: (1) Monkeypox virus (FAM);(2) Kontroll Intern (CY5).

4.3 Mexxi l-protokoll taċ-ċikliżmu li ġej

Protokoll ta 'ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio:

Passi		Temperatura	Ħin	Ċikli
1	Denaturazzjoni minn qabel	95℃	2 minuti	1
2	Denaturazzjoni	95℃	10 s	45
2	Ittemprar, estensjoni, akkwist tal-fluworexxenza	60℃	30 s	45

Protokoll ta' BTK-8:

Passi		Temperatura	Ħin	Ċikli
1	Denaturazzjoni minn qabel	95℃	2 minuti	1
2	Denaturazzjoni	95℃	5 s	45
2	Ittemprar, estensjoni, akkwist tal-fluworexxenza	60℃	14 s	45

5. Analiżi tar-riżultati (jekk jogħġbok irreferi għall-Manwal tal-Utent tal-Istrument)

Wara r-reazzjoni, ir-riżultati jiġu ffrankati awtomatikament.Ikklikkja "Analizza" biex tanalizza, u l-istrument jinterpreta awtomatikament il-valuri Ct ta 'kull kampjun fil-kolonna tar-riżultat.Ir-riżultati tal-kontroll negattivi u pożittivi għandhom jikkonformaw ma' dan li ġej "6. Kontroll tal-Kwalità".

6. Kontroll tal-Kwalità

6.1 Kontroll Negattiv: Nru Ct jew Ct>40 fil-kanal FAM, Ct≤40 fil-kanal CY5 b'kurva ta 'amplifikazzjoni normali.

6.2 Kontroll Pożittiv: Ct≤35 fil-kanal FAM b'kurva ta 'amplifikazzjoni normali, Ct≤40 fil-kanal CY5 b'kurva ta' amplifikazzjoni normali.

6.3 Ir-riżultat huwa validu jekk jintlaħqu l-kriterji kollha ta' hawn fuq.Inkella, ir-riżultat huwa invalidu.

Interpretazzjoni tar-Riżultati

Ir-riżultati li ġejjin huma possibbli:

	Valur Ct tal-kanal FAM	Valur Ct tal-kanal CY5	Interpretazzjoni
1#	Nru Ct jew Ct>40	≤40	Virus Monkeypox negattiv
2#	≤40	Kwalunkwe riżultat	Monkeypox virus pożittiv
3#	40~45	≤40	Test mill-ġdid;jekk għadu 40 ~ 45, irrapporta bħala 1 #
4#	Nru Ct jew Ct>40	Nru Ct jew Ct>40	Invalidu

NOTA: Jekk iseħħ riżultat invalidu, il-kampjun jeħtieġ li jinġabar u jerġa' jiġi ttestjat.

Informazzjoni dwar l-Ordni

Isem tal-Prodott	Cat.Nru	Daqs	Kampjun	Ħajja fuq l-ixkaffa	Trans.& Sto.Temp.
Monkeypox Virus Real Time PCR Kit	B001P-01	48 test/kit	Serum/Leżjoni Exudate	12-il Xahar	-25～-15℃